数码荧光显微镜的结构与原理如下:
一、结构:
1、光源:通常采用超高压汞灯或氙气灯作为光源。这些光源能够发出高能量的紫外光或蓝紫光,激发样品中的荧光物质。例如,200W的超高压汞灯中间呈球形,内充一定数量的汞,工作时由两个电极间放电,引起水银蒸发,球内气压迅速升高,当水银全蒸发时,可达50~70个标准大气压力。其发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。
2、滤色系统:包括激发滤板和压制滤板。激发滤板用于选择能够激发样品中荧光物质的特定波长的光;压制滤板则用于阻挡激发光通过,只让荧光物质发出的荧光透过。不同厂家生产的滤板型号可能不统一,但一般都以基本色调命名,并且有各自的透光范围和特点。
3、物镜和目镜:物镜的作用是将光源发出的光聚焦到样品上,并收集样品发出的荧光;目镜则用于观察放大后的荧光图像。在荧光显微镜中,多用低倍目镜,如5×和6.3×,以提高荧光图像的亮度。
4、落射光装置:新型的落射光装置是从光源来的光射到干涉分光滤镜后,波长短的部分(紫外和紫蓝)由于滤镜上镀膜的性质而反射,当滤镜对向光源呈45°倾斜时,则垂直射向物镜,经物镜射向标本,使标本受到激发,这时物镜直接起聚光器的作用。同时,滤长长的部分(绿、黄、红等),对滤镜是可透的,因此,不向物镜方向反射,滤镜起了激发滤板作用,由于标本的荧光处在可见光长波区,可透过滤镜而到达目镜观察,荧光图像的亮度随着放大倍数增大而提高,在高放大时比透射光源强。它除具有透射式光源的功能外,更适用于不透明及半透明标本,如厚片、滤膜、菌落、组织培养标本等的直接观察。近年研制的新型荧光显微镜多采用落射光装置,称之为落射荧光显微镜。
二、原理:
光源发出的紫外光或蓝紫光,经过激发滤板后,照射到样品上。样品中的荧光物质受到激发后,会发射出各种不同颜色的荧光。这些荧光经过物镜收集,然后通过阻断滤色镜,阻止所有的紫外线通过,只允许通过诱发的荧光通过。最后,荧光图像经过目镜放大后被人眼观察到。
总之,数码荧光显微镜通过特定的光源、滤色系统、物镜和目镜等结构组件,以及利用荧光物质受激发光照射后发射荧光的原理,实现了对样品的观察和分析。